Extração de DNA de microcosmo contaminado com óleo pesado e amplificação do gene rpoB
DOI:
https://doi.org/10.17533/udea.acbi.329316Palavras-chave:
extracción de ADN, amplificación PCR, microcosmos, petróleo pesado, rpoBResumo
Este trabalho descreve um novo método de extração de DNA genômico de solo contaminado com óleo pesado. O método combina lavagens de solo usando três soluções de lavagem com lise celular enzimática (método SW-EL). O método SW-EL foi validado pela extração de DNA de amostras de 0,5 g de microcosmos preparadas com solo artificialmente contaminado com óleo pesado a 1 e 10% (p / p) e inoculado com um consórcio bacteriano. Comparado a um protocolo estabelecido para lise e obtenção de DNA utilizando o kit comercial Gene ReleaserTM (Bioventures) (método GRL), o novo método SW-EL permitiu a obtenção de uma quantidade maior de DNA. Com a adição do Gene Releaser como resina quelante à reação de PCR, os genes rpoB (usados como modelo) foramplificados, indicando que o método SW-EL pode ser usado para analisar os consórcios m amicrobianos presentes em solos contaminados com óleo pesado.
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