Evaluación de cinco protectores para la crioconservación de semen de Cachama Blanca (Piaractus brachypomus)

Abstract

Resumen

La Cachama Blanca (Piaractus brachypomus) es un pez de escama de los Llanos Orientales colombianos, considerada la especie íctica nativa más importante de la acuicultura colombiana. La utilización de semen criopreservado para la reproducción de esta especie puede traer grandes posibilidades de mejoramiento genético; sin embargo, a pesar que han sido realizados esfuerzos para lograr la crioconservación de semen, los índices de fertilidad aún son inferiores a los observados utilizando semen fresco. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la calidad y fertilidad de semen de cachama blanca, crioconservado con cinco diferentes sustancias crioprotectoras: glicerol (GLY), dimetil sulfóxido (DMSO), metanol (MET), propilen glicol (PPG) y etilen glicol (ETG). Se utilizó semen de 15 reproductores adultos, 4.8 ± 1.1 kg de peso corporal, tratados con 4.0 mg/kg de extracto de hipófisis de carpa (EPC) vía IM. El semen fue recolectado mediante estrujamiento, recibido en tubos graduados y mantenido a temperatura ambiente (26°C) hasta su evaluación. Los resultados están expresados en promedio ± error estándar. Antes de la dilución la movilidad masal fue de 92 ± 1% y la concentración de 17.7 x 10⁹ ± 1.8 x 10⁹ espermatozoides por mL. Se utilizaron dos diluyentes: D1 (glucosa [C₆H₁₂O₆] 5,5 g; yema de huevo 7.0 mL y agua destilada c.s.p. 100 mL) y D2 (leche entera en polvo 15 g, agua destilada c.s.p. 100 mL). Para D1 se utilizó como crioprotector 5% (D1-DMSO 5 o D1-GLY 5), 10% (D1-DMSO 10 o D1-GLY 10) o 15% (D1-DMSO 15 o D1-GLY 15) de dimetil sulfóxido o de glicerol, respectivamente. Para el D2, 5% (D2-MET 5, D2-PPG 5 o D2-ETG 5), 10% (D2-MET 10, D2-PPG 10 o D2-ETG 10) o 15% (D2-MET 15, D2-PPG 15 o D2-ETG 15) de metanol, propilen glicol o etilen glicol, respectivamente. Los mayores porcentajes de movilidad masal posdescongelación fueron observados cuando se utilizó D2-PPG 5 (64 ± 2.4%) y D2-MET 10 (57 ± 4.9%) (p < 0.05). Por otra parte, los mayores porcentajes de fertilidad fueron obtenidos con semen crioconservado utilizando D2-ETG 5 (38 ± 5.3%) y D1-DMSO 10  (36 ± 6%). Sin embargo, estos porcentajes fueron inferiores (p < 0.05) cuando se compararon con los observados con semen fresco.

Palabras clave: crioconservación, crioprotectores, peces, semen.

Summary

Cachama Blanca (Piaractus brachypomus) is a fish of the Orinoco River basin from Colombia; it has been considered one of the most important native species for the continental Colombian aquaculture. The use of the cryopreserved semen for the assisted reproduction in these species could bring great possibilities in the genetic development; despite the efforts carried out to obtain an efficient protocol for semen cryopreservation, the fertilization rate has been lower than the results of fresh semen. The aim of this work was to evaluate the quality and fertility of semen of Cachama Blanca cryopreserved with five different cryoprotectant: glycerol, dimethyl sulphoxide, methanol, propyleneglycol and ethylene glycol. Semen of 15 male adults was used, 4.8 ± 1.1 kg of body weight, the spermiation was induced with pituitary carp extract (PCE), 4.0 mg.kg body weight IM. The semen was collected by gentle stripping, the samples were collected in graduated tubes and were maintained at environment temperature (26°C) until evaluation. The results are mean ± error standard. Before the dilution, the masal motility was 92 ± 1% and the sperm concentration was 17.7 x 10⁹ ± 1.8 x 10⁹ spermatozoa by mL. Two extenders were used: D1 (glucose [C₆H₁₂O₆] 5.5 g; egg yolk 7.0 mL and distilled water c.s.p. 100 mL) and D2 (whole milk powder 15g, distilled water c.s.p. 100 mL). For D1 was used like cryoprotector 5% (D1-DMSO 5 o D1-GLY 5), 10% (D1-DMSO 10 o D1-GLY 10) o 15% (D1-DMSO 15 o D1-GLY 15) of dimethyl sulphoxide and glycerol, respectively. For D2, 5% (D2-MET 5, D2-PPG 5 o D2-ETG 5), 10% (D2-MET 10, D2-PPG 10 o D2-ETG 10) o 15% (D2-MET 15, D2-PPG 15 o D2-ETG 15) of methanol, propyleneglycol or ethyleneglycol, respectively. The higher masal motility post thawing percentages were (p < 0.05) observed when L-PPG (64 ± 2,4%) y L-MET 10 (57 ± 4.9%). On the other hand, the highest fertilization percentages were obtained with cryopreserved semen using D2-ETG 5     (38 ± 53%) y D1-DMSO 10 (36 ± 6%). However, these percentages were lower (p < 0.05) when compared with the other samples of fresh semen.

Key words: cryopreservation, cryoprotectant, fish, semen.