Efecto de la heparina y de la concentración espermática sobre el porcentaje de fertilización de oocitos bovinos in vitro
DOI:
https://doi.org/10.17533/udea.rccp.324000Palabras clave:
bovino, fertilización in vitro, heparina, swim upResumen
El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de diferentes concentraciones de heparina y de semen en el medio de fertilización sobre el porcentaje de oocitos bovinos fertilizados in vitro. En el experimento uno, los oocitos obtenidos de ovarios de matadero fueron madurados in vitro y distribuidos al azar en seis tratamientos para fertilización in vitro, de acuerdo a las concentraciones de heparina (2, 4, 8, 10, 16, 20 µg/ml). En el experimento dos, una vez seleccionada la concentración de heparina en experimento 1, se evaluaron tres dosis de espermatozoides en el medio de fertilización (0.5x106 espermatozoides/ml, 1x106espermatozoides/ml y 2x106espermatozoides/ml). En cada experimento se utilizó un diseño completamente al azar y los datos fueron analizados por ANAVA. La concentración de heparina tuvo efecto (p<0.05) en el porcentaje de oocitos fertilizados encontrándose los mejores resultados en la concentración de 10 µg/ml, con una tasa de penetración del 67%. La concentración espermática afecta la fertilización, encontrándose la mayor proporción de oocitos con fertilización normal (74%) al utilizar concentración 2x106 espermatozoides/ml. Sin embargo, no fue significativamente diferente a la concentración de 1x106 (p>0.05). Los resultados indican que la tasa de fertilización guarda relación directa con la dosis de heparina y la concentración espermática.
Descargas
Citas
Camargo LS, Sá W, Ferreira AM, Viana JH. Efeito de sistemade cultivo, célula somática e soro em co-cultura sobre odesenvolvimento de embrioes bovinos fecundados in vitro.Arq Bras Med Vet Zootec 2001; 23:78-83. DOI: https://doi.org/10.1590/S0102-09352001000100012
Camargo LS, Sá W, Ferreira AM, Viana JH, Freitas C.Concentracão espermática na fecundacão in vitro, com semende touro da raca Guzará. Arq Bras Med Vet Zootec 2000;52:59-64. DOI: https://doi.org/10.1590/S0102-09352000000100014
Chacon LJ, Estrada JL. Evaluación de diferentes compuestosen la estandarización de la técnica de fertilización in vitro enbovinos. Tesis para Msc. Universidad Nacional Colombia(1997).
Eyestone W, First N. Co-culture of early cattle embryos tothe blastocyst stage with oviductal tissue or in conditionedmedium. J Reprod Fertil 1989; 85:715-720. DOI: https://doi.org/10.1530/jrf.0.0850715
Ferry L, Mermillod P, Massip A, Dessy F. Bovine embryosculture in serum-poor oviduct-conditioned medium needcooperation to reach the blastocist stage. Theriogenology1994; 42: 445-453. DOI: https://doi.org/10.1016/0093-691X(94)90682-9
Hernández Ledezma JJ, Villanueva C, Sikes JD, RobertsRM. Effects of CZB versus mediuim 199 and of conditioningcultura media with either bovine oviductal epithelial cells orbuffalo rat liver cells on the development of bovine zygotesderived by in vitro maduretion-in vitro fertilizationprocedures. Theriogenology 1993; 39:1267-1277. DOI: https://doi.org/10.1016/0093-691X(93)90229-X
Kim BK, Lee SC, Lee KS, Lee BK, Kim JH. Effect ofmedium milieu on sperm penetration and pronuclearformation of bovine oocitos matured in vitro.Theriogenology.2002; 57:2093 -104. DOI: https://doi.org/10.1016/S0093-691X(02)00695-7
Kurtu JM, Ambrose JD, Rajamahendran R. Cleavage rata ofbovine oocytes in-vitro is affected by bulls but not spermconcentrations. Theriogenoloy 1996; 45:257 – 265. DOI: https://doi.org/10.1016/0093-691X(96)84730-3
Leven K, Clay A, Burnley A, Benjamin G. Production ofviable bovine blastocysts in defined in vitro conditions.Biology of reproduction 1995; 52:1410 – 1417. DOI: https://doi.org/10.1095/biolreprod52.6.1410
Lu KH, Seidel GE Jr. Effects of heparin and spermconcentration on cleavage and blastocyst development ratesof bovine oocytes inseminated with flow cytometrically-sorted sperm. Theriogenology 2004; 62:819-30. DOI: https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2003.12.029
Niwa, K, Ohgoda, O. Synergistic effect of caffein and heparinon in-vitro fertilization of cattle oocytes matured in culture.Theriogenology 1988; 30:733-741. DOI: https://doi.org/10.1016/0093-691X(88)90308-1
Parrish JJ, Susko-Parrish, First NL. Effect of heparin andchondroitin sulfate on the acrosome reaction and fertilityof bovine sperm in vitro. Theriogenology. 1985; 24: 537-549. DOI: https://doi.org/10.1016/0093-691X(85)90060-3
Parrish JJ, Susko-Parrish JL, Leibfried Rufledge ML, CristerEJ Eyestone EH, First NL. Bovine in-vitro fertilization withfrozen-thawed semen. Theriogenoloy 1986; 25:591-600. DOI: https://doi.org/10.1016/0093-691X(86)90143-3
Parrish JJ, Susko-Parrish MA, Winer A, First NL.Capacitation of bovine sperm by heparin. Biol Reprod 1988;38:1171-1180. DOI: https://doi.org/10.1095/biolreprod38.5.1171
Parrish JJ, Susko Parrish JL, Handrow RR, Sims MM andFirst NL. Capacitation of bovine spermatozoa by oviductfluid. Biol Reprod 1989; 40:1020-1025. DOI: https://doi.org/10.1095/biolreprod40.5.1020
Pinyopummintr T. and Bavister B. In vitro- matured/invitro- fertilized bovine oocytes can develop into morulae/blastocists in chemically defined, protein- free culture media.Biol Reprod 1991; 45: 736-742. DOI: https://doi.org/10.1095/biolreprod45.5.736
Rieger D, Grisart B, Semple E, Van Langendonckt A,Betteridge KJ, et al. Comparison of the effects of oviductalcell co-culture and oviductal cell-conditioned medium on thedevelopment and metabolic activity of cattle embryos. JReprod Fertil 1995; 105: 91-98. DOI: https://doi.org/10.1530/jrf.0.1050091
Saeki K, Nagao Y, Hoshi M and Nagai M. Effect of heparin,sperm concentration and bull variation on in vitro fertilizationof bovine oocytes in a protein-free medium. Theriogenology1995; 43:751-759. DOI: https://doi.org/10.1016/0093-691X(95)00017-3
Shamsuddin M, Niwa K, Larsson B, Rodriguez-MartinezH. In vitro maturation and fertilization of bovine oocytes.Reprod Dom Anim 1996; 31:613-622.
Xu KP, Greve T. A detailed analysis of early events duringin-vitro fertilization of bovine folicular oocytes. J ReprodFertil 1988; 82:127-134. DOI: https://doi.org/10.1530/jrf.0.0820127
Van Inzen WG, Van Stekelenburg-Hamers AE, Weima SM,Kruip TA, Bevers MM, et al. Culture of bovine embryos tothe blastocist stage using buffalo rat liver (BRL) cells.Theriogenology 1995; 43:723-738. DOI: https://doi.org/10.1016/0093-691X(95)00015-Z
Descargas
Publicado
Cómo citar
Número
Sección
Licencia
Derechos de autor 2016 Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias
Esta obra está bajo una licencia internacional Creative Commons Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0.
Los autores permiten a RCCP reimprimir el material publicado en él.
La revista permite que los autores tengan los derechos de autor sin restricciones, y permitirá que los autores conserven los derechos de publicación sin restricciones.
