Estandarización del aislamiento y caracterización de células estromales de decidua y útero murinos

Lina Cadavid; Cristina Ávila; Angela Patricia Cadavid

doi:10.17533/udea.rccp.324497

Autores/as

Lina Cadavid
Cristina Ávila
Angela Patricia Cadavid

DOI:

https://doi.org/10.17533/udea.rccp.324497

Palabras clave:

células BeWo, células estromales, células HeLa, decidua murina, macrófagos deciduales

Resumen

Las células estromales son las células más abundantes presentes en la decidua y juegan un papel muy importante durante la implantación, la nutrición fetal y el mantenimiento del embarazo. Los procedimientos que se han descrito para el aislamiento de células estromales requieren el uso de muchos anticuerpos monoclonales ya que hay contaminación con otros tipos celulares en la decidua y además algunos marcadores características de células estromales, muestran variabilidad en los diferentes días de la gestación. En este estudio se estandarizó un procedimiento de aislamiento por digestión enzimática, gradiente de densidad y adherencia al plástico y se caracterizaron las células estromales murinas por exclusión de marcadores que se expresan en macrófagos (F4-80), células epiteliales y trofoblasto (citoqueratina-7), obteniéndose un 98% de células negativas para estos marcadores que correspondería a las células estromales. Esta técnica de aislamiento permite obtener células estromales con métodos menos costosos y altamente eficientes que facilita el acceso a un modelo celular de gran utilidad en el estudio de la fisiología de la gestación en diferentes especies.

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Arnold JT, Kaufman DG, Seppala M, Lessey BA. Endometrial stromal cells regulate epithelial cell growth in vitro: a new co-culture model. Hum Reprod 16 (5): 836-45, 2001.

Bany BM, Kennedy TG. Role of interleukin 1 in the regulation of cyclooxygenase gene expression in rat endometrial stromal cells. J Reprod Fertil 1999; 115: 125-31.

Bowen JA, Newton GR, Weise DW, Bazer FW, Burghardt RC. Characterization of a polarized porcine uterine epithelial model system. Biol Reprod 1996; 55: 613-9.

Chou CS, Tai CJ, MacCalman CD, Leung PC. Dose-dependent effects of gonadotropin releasing hormone on matrix metalloproteinase (MMP)-2, and MMP-9 and tissue specifi c inhibitor of metalloproteinases-1 messenger ribonucleic acid levels in human decidual stromal cells in vitro. J Clin Endocrinol Metab 2003; 88: 680-8.

Corver WE, Ter Haar NT, Dreef EJ, Miranda NF, Prins FA, et al. High-resolution multi-parameter DNA fl ow cytometry enables detection of tumour and stromal cell subpopulations in paraffi n-embedded tissues. J Pathol 2005; 206: 233-41.

Dunn CL, Critchley HO, Kelly RW. IL-15 regulation in human endometrial stromal cells. J Clin Endocrinol Metab 2002; 87: 1898-901.

Fazleabas AT, Strakova Z. Endometrial function: cell specifi c changes in the uterine environment. Mol Cell Endocrinol 2002; 186: 143-7.

Geggel HS, Gipson IK. Removal of viable sheets of conjunctival epithelium with dispase II. Invest Ophthalmol Vis Sci 1985; 26: 15-22.

Hwang JH, Park MI, Hwang YY, Yoo HJ, Mardon HJ. The characteristics of integrins expression in decidualized human endometrial stromal cell induced by 8-Br-cAMP in in vitro. Exp Mol Med 2002; 34: 194-200.

Kawano Y, Nakamura S, Nasu K, Narahara H, Miyakawa I. The effect of epidermal growth factor on vascular endothelial growth factor secretion by endometrial stromal cells. Clin Exp Med 2002; 2: 69-75.

King A. Uterine leukocytes and decidualization. Hum Reprod Update 2000; 6: 28-36,

.Komatsu T, Konishi I, Mandai M, Mori T, Hiai H, Fukumoto M. Expression of class I human leukocyte antigen (HLA) and beta2-microglobulin is associated with decidualization of human endometrial stromal cells. Hum Reprod 1998; 13: 2246-51.

Nasu K, Matsui N, Narahara H, Tanaka Y, Miyakawa I. Effects of interferon-gamma on cytokine production by endometrial stromal cells. Hum Reprod 1998; 13: 2598-601.

Nasu K, Narahara H, Matsui N, Kawano Y, Tanaka Y, Miyakawa I. Platelet-activating factor stimulates cytokine production by human endometrial stromal cells. Mol Hum Reprod 1999; 5: 548-53.

Nasu K, Sugano T, Fujisawa K, Arima K, Narahara H, Miyakawa I. Effects of interleukin-4 on the in-vitro production of cytokines by human endometrial stromal cells. Mol Hum Reprod 2001; 7: 265-70.

Nasu K, Arima K, Fujisawa K, Nishida M, Kai K, Miyakawa I. Secretion of keratinocyte growth factor by cultured human endometrial stromal cells is induced through a cyclic adenosine monophosphate-dependent pathway. Fertil Steril 2002; 77: 392-5.

Nasu K, Fukuda J, Sun B, Nishida M, Miyakawa I. Interleukin-13 and tumor necrosis factor-beta differentially regulate the production of cytokines by cultured human endometrial stromal cells. Fertil Steril 2003; 79: 821-7.

Oliver C, Cowdrey N, Abadia-Molina AC, Olivares EG. Antigen phenotype of cultured decidual stromal cells of human term decidua. J Reprod Immunol 1999; 45 (1): 19-30.

Vigano P, Somigliana E, Mangioni S, Vignali M, Di Blasio AM. Expression of interleukin-10 and its receptor is up-regulated in early pregnant versus cycling human endometrium. J Clin Endocrinol Metab 2002; 87: 5730-6.

Yoshino O, Osuga Y, Hirota Y, Koga K, Hirata T, et al. Endometrial stromal cells undergoing decidualization down-regulate their properties to produce proinfl ammatory cytokines in response to interleukin-1 beta via reduced p38 mitogen-activated protein kinase phosphorylation. J Clin Endocrinol Metab 2003; 88: 2236-41.