O método de criopreservação e a composição da solução de vitrificação afetar a viabilidade de embriões bovinos produzidos in vitro

Resumo

não existe um meio criopreservante com uma composição perfeita para a vitrificação de embriões bovinos in vitro (PIV). Objetivo: avaliar se a composição de diferentes soluções de vitrificação afeta a viabilidade de embriões bovinos PIV, em comparação com embriões criopreservados pelo método convencional de congelação lenta. Métodos: embriões bovinos PIV foram criopreservados por dois métodos: 1) congelação lenta controlada (1,5 M etilenoglicol (EG)), 2) vitrificação com duas soluções diferentes: (1) Protocolo V1: Kit comercial de vitrificação, (2) Protocolo 2: soluções definidas de vitrificação (20% EG; 20% dimetilsulfóxido (DMSO); 20% soro fetal de bovino (FBS)) e aquecimento (20% FBS; 0,2 M sacarose). A viabilidade do embrião foi avaliada pelo número de embriões re-expandidos e desenvolvidos até o estágio de blastocisto expandido após 24, 48 e 72 h descongelamento/aquecimento. Resultados: a taxa de sobrevivencia dos embriões afetou-se pelo método de criopreservação: a frequência dos embriões re-expandidos após 24 h de aquecimento/descongelamento foi maior nos embriões vitrificados com os protocolos V1 e V2 (89% e 86,2%; respectivamente), quando foi comparada com a frequência dos embriões criopreservados pelo método de congelação lenta (73,6%, p < 0,05). Uma maior porcentagem de embriões criopreservados por vitrificação eclodiu após 72 h. O protocolo V2 apresentou maior porcentagem de embriões eclodidos (84,3%) quando comparado com o protocolo V1 (64%, p < 0,05), ambos apresentaram maior porcentagem de eclosão quando comparados ao método de congelação lenta (55,2%; p < 0,05). Conclusões: o método de criopreservação e composição da solução de vitrificação têm um impacto direto na viabilidade dos embriões bovinos PIV.